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內酰胺酶檢測方法較為多樣
更新時間:2023-04-24 文章更新于2023-04-24  點擊次數:654次
  內酰胺酶(β-lactamase)是一種廣泛存在于細菌種群中的酶類,其對β-內酰胺類抗生素的分解作用已成為目前細菌耐藥性的重要機制之一。因此,內酰胺酶檢測已成為臨床醫生確定細菌感染耐藥性及制定針對性治療方案的重要方法。
 
  內酰胺酶的檢測方法較為多樣,包括酶活測定、基因檢測、酶免疫學檢測、質譜檢測等。其中,酶活測定是一種經典的方法,其基本原理是將待檢測的菌株施加于含內酰胺酶底物的瓊脂板上,通過比較菌落周圍熒光圈的直徑或反應時間,判斷內酰胺酶是否存在及其活性大小。尤其在發生感染變異、產生耐藥突變或被選擇性壓力過濾等情況下,這種方法常常顯得格外靈敏。
 
  酶活測定具有操作簡便、經濟實惠、金標準作用等優點,但也存在著適用范圍狹窄、無法區分不同酶型、與物理因素相互干擾等缺點。因此,在實際進行檢測時,往往需要結合多種方法進行分析研判,使結果得到更準確、更可靠的評估。
 
  基因檢測作為內酰胺酶檢測的新興方法,憑借著其能夠直接檢測與酶活性相關的β-內酰胺酶基因本體、檢測速度較快、檢測靈敏度及特異性高、結果可靠性高等優勢,已成為近年來常用的檢測方法之一。目前,PCR技術和DNA基因芯片技術成為應用廣泛的基因檢測方法。
 
  酶免疫學檢測則是一種利用內酰胺酶特異性抗體對其進行檢測的方法,其基本原理是通過將抗體捕獲內酰胺酶,再添加辣根過氧化物酶標記的二抗體,通過化學反應得到顏色的變化以判斷酶是否存在。該方法具有響應快、可定量檢測、能夠鑒定多種酶型等優勢,但其靈敏度略低于基因檢測。
 
  另外,質譜檢測則是一種非常靈敏的檢測手段,其基本原理是將蛋白質樣本載入質譜儀中,利用質子或離子作為荷載掃描樣本,根據蛋白質質量的不同獲得蛋白質質譜圖,通過質譜圖的比對來確定內酰胺酶指紋。質譜法具有全面準確、定量檢測、高通量等優勢,但其設備要求高,操作難度大,且檢測成本昂貴。
 
  內酰胺酶檢測是一項十分重要的臨床檢測項目,無論使用哪種方法,其目的均是要對于患者的病情進行更加精確的分析、進而定出更為科學合理的治療方案。同時,我們也需要在不斷探索新的檢測技術的同時,不斷提升現有檢測方法的檢測準確度和穩定性,從而在臨床中得到更好的應用效果。
 

 

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